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新型基因治療遞送載體被發(fā)現(xiàn),胎牛血清助力科研

更新時間:2023-04-23  |  點擊率:619

胎牛血清是細胞培養(yǎng)過程中常用添加物,選擇合適的胎牛血清,有利于實驗的穩(wěn)定。

膜融合對于分子在細胞間的運動、受精、多核細胞的發(fā)育和病毒感染至關(guān)重要。兩層膜的融合是細胞和被包膜病毒進入新結(jié)構(gòu)域的一種機制。細胞-細胞融合導(dǎo)致分離的細胞內(nèi)容物混合到合胞細胞質(zhì)中,病毒-細胞融合導(dǎo)致病毒基因組進入細胞。膜融合由融合原直接介導(dǎo),融合原是一類通過多種結(jié)構(gòu)和生化機制重塑膜的蛋白質(zhì)。鑒于其驅(qū)動病毒進入細胞的功能,病毒融合原在異種系統(tǒng)中用于控制遺傳物質(zhì)或細胞物質(zhì)向細胞的傳遞。事實上,VSV- g是水皰性口炎病毒(VSV)的梭原,并被用于其他包膜病毒,在實驗室和臨床環(huán)境中轉(zhuǎn)導(dǎo)多種細胞類型。這一過程被稱為假分型,并已與來自病毒、植物和蠕蟲的結(jié)構(gòu)保守的融合原一起用于研究融合機制并優(yōu)化病毒靶向和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。哺乳動物細胞-細胞融合原在其他系統(tǒng)中表現(xiàn)出最小的同源性,是否可以替代病毒的融合原并介導(dǎo)病毒與細胞之間的融合尚不清楚。

Myomaker和Myomerger(也稱為Myomixer/Minion)是骨骼肌發(fā)育和再生的融合原。這些蛋白的表達在肌肉中受到空間和時間的控制,它們不存在于靜止的衛(wèi)星細胞中,但在分化過程中被激活,然后在成熟的肌纖維中被下調(diào)。Myomaker和Myomerger是成肌細胞融合所必需的完整膜蛋白,它們的表達可誘導(dǎo)正常非融合細胞的融合。然而,Myomaker和Myomerger不具有典型的可以與跨膜相互作用的經(jīng)典融合原的長胞外結(jié)構(gòu)域。相反,Myomaker和mymerger在順式膜上起作用,通過機制改變局部環(huán)境并驅(qū)動融合。此外,還有許多細胞過程,包括細胞接觸和肌動蛋白成核,與肌原性融合原合作,驅(qū)動肌肉細胞中的膜合并。由于這些多重區(qū)分特征,肌原性融合原是否能在缺乏平行細胞活動的系統(tǒng)中發(fā)揮作用并不是直觀明顯的。Myomaker和mymerger公司評估融合原性的一個指標是采用無細胞系統(tǒng),如工程膜,并評估它們?nèi)〈《救诤显哪芰Α?/p>

由于肌肉融合原在骨骼肌中特異性起作用,它們在病毒膜上的包含可能將其靶向肌肉。如果Myomaker和mymerger可以改變包膜病毒對骨骼肌的趨向性,它可以幫助提供治療方式。肌肉縮減癥等遺傳性肌肉疾病的矯正是一個問題,因為肌肉分布在全身難以接近的位置。目前的方法包括通過腺相關(guān)病毒(AAV)修復(fù)基因,在臨床前模型中顯示出巨大的功效,但尚未實現(xiàn)全面的臨床應(yīng)用。治療性包膜病毒的開發(fā)并沒有取得進展,盡管它們具有理想的特征,包括更大的包裝能力、整合到基因組中、干細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)以及重新給藥的潛力。帶毒融合原的假型慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)營養(yǎng)不良的肌纖維和肌肉衛(wèi)星細胞,但效率相對較低,而且由于對病毒假型的免疫反應(yīng),難以全身遞送。無法將包膜病毒特異性和有效地靶向骨骼肌仍然是這類運載工具的主要障礙。

締一生物公司的Ausbian進口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低。

近日,研究人員確定Myomaker和mymerger可以在沒有細胞機制補充的情況下驅(qū)動基本膜的融合。

文章標題為《Enveloped viruses pseudotyped with mammalian myogenic cell fusogens target skeletal muscle for gene delivery》

因此,該研究報道了一類特殊的包膜病毒的產(chǎn)生,其中Myomaker和mymerger可以在功能上替代天然病毒融合原,并直接感染特異性地針對肌源性靶點,以傳遞治療物質(zhì)。

包膜病毒進入細胞是由融合蛋白介導(dǎo)的,融合蛋白在膜之間形成復(fù)合體,驅(qū)動融合所需的重排。骨骼肌的發(fā)育也需要祖細胞之間的膜融合事件來形成多核肌纖維。Myomaker和mymerger是肌肉特異性的細胞融合原,但在結(jié)構(gòu)或功能上與經(jīng)典的病毒融合原不同。

研究人員想知道肌肉融合原是否可以在功能上替代病毒融合原,盡管它們的結(jié)構(gòu)是并不常見,并將病毒融合到細胞中。研究人員報道在包膜病毒膜上的Myomaker和Myomerger工程導(dǎo)致骨骼肌的特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)。研究還證明了局部和全身注射帶有肌肉融合原假型的病毒粒子可以將微肌營養(yǎng)不良蛋白(μDys)傳遞到杜氏肌營養(yǎng)不良小鼠模型的骨骼肌。通過利用肌原膜的固有特性,研究建立了一個將治療材料輸送到骨骼肌的平臺。

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